北京時間3月31日，Nature Neuroscience以封面文章的形式，在線發(fā)表了題為《小鼠前額葉單神經(jīng)元投射圖譜》的研究論文，該研究由中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心（神經(jīng)科學(xué)研究所）、神經(jīng)科學(xué)國家重點實驗室、上海腦科學(xué)與類腦研究中心、嚴(yán)軍研究組、徐寧龍研究組，以及華中科技大學(xué)蘇州腦空間信息研究院、武漢光電國家研究中心龔輝團隊合作完成。該研究在國際介觀圖譜領(lǐng)域率先重構(gòu)了小鼠前額葉皮層6357個單神經(jīng)元全腦投射圖譜，建立了目前國際上最大的小鼠全腦介觀神經(jīng)聯(lián)接圖譜數(shù)據(jù)庫；首次發(fā)現(xiàn)小鼠前額葉皮層中存在64類神經(jīng)元投射亞型，揭示了其空間分布規(guī)律，闡明了前額葉內(nèi)部模塊化的連接網(wǎng)絡(luò)和等級結(jié)構(gòu)、神經(jīng)元轉(zhuǎn)錄組亞型與投射亞型的對應(yīng)關(guān)系，從而揭示了前額葉皮層內(nèi)部連接和外部投射的規(guī)律，并提出了前額葉皮層可能的工作模型。該研究不僅為深入探究高級認(rèn)知功能的神經(jīng)機制奠定了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，而且為探索全腦介觀神經(jīng)聯(lián)接圖譜提供了重要的技術(shù)支撐。

　　大腦皮層不同腦區(qū)之間的信息交流依賴于神經(jīng)元的長程投射，擁有不同投射模式的神經(jīng)元往往參與不同的腦功能。因此，研究神經(jīng)元的投射模式及其基本規(guī)律，對于解析大腦的組織結(jié)構(gòu)和信息處理機制具有重要意義。以往研究利用群體神經(jīng)元示蹤技術(shù)，對小鼠皮層神經(jīng)元的全腦投射進行了廣泛研究，發(fā)現(xiàn)皮層投射神經(jīng)元可分為端腦內(nèi)側(cè)束神經(jīng)元、錐體束神經(jīng)元和皮層丘腦神經(jīng)元。然而，近年來的研究表明，在這些傳統(tǒng)的神經(jīng)元類型中還存在著更復(fù)雜、功能分工更精細(xì)的神經(jīng)元亞型。系統(tǒng)地繪制大腦單神經(jīng)元水平的投射圖譜，有助于發(fā)現(xiàn)新的神經(jīng)元亞型和腦網(wǎng)絡(luò)的聯(lián)接規(guī)則，從而更系統(tǒng)全面地剖析大腦的工作原理。

　　繪制小鼠等哺乳動物大腦中單神經(jīng)元水平的全腦投射圖譜，需要在太字節(jié)（TB）量級的全腦光學(xué)成像大數(shù)據(jù)中，對單神經(jīng)元形態(tài)逐個進行三維重構(gòu)。整個過程工作量大、極為復(fù)雜和耗時，是國際上公認(rèn)的難題。為解決這一問題，嚴(yán)軍研究組博士茍凌峰通過數(shù)年的努力攻關(guān)，自主開發(fā)了以Fast Neurite Tracer（FNT）為代表的TB級光學(xué)成像大數(shù)據(jù)神經(jīng)元追蹤及分析軟件，為研究模式動物各腦區(qū)的神經(jīng)聯(lián)接圖譜建立了一套研究方法和流程。

　　前額葉皮層在決策、工作記憶、注意力等高級認(rèn)知功能中扮演重要角色，其結(jié)構(gòu)和功能的異常會導(dǎo)致多種腦疾病。前額葉神經(jīng)元投射范圍很廣，幾乎覆蓋大部分腦區(qū)，包括皮層、紋狀體、丘腦、中腦和后腦等。已有研究多利用群體神經(jīng)元示蹤技術(shù)來研究前額葉皮層神經(jīng)元的全腦投射模式，在單個神經(jīng)元水平上，前額葉神經(jīng)元軸突投射的規(guī)律尚不清楚。盡管目前的研究表明小鼠皮層不同腦區(qū)之間存在模塊和等級結(jié)構(gòu)，但關(guān)于前額葉內(nèi)部連接網(wǎng)絡(luò)的性質(zhì)還有待研究。

　　通過與華中科技大學(xué)龔輝團隊、腦智卓越中心全腦介觀神經(jīng)聯(lián)接圖譜平臺等團隊合作，該研究獲得161個小鼠的全腦成像數(shù)據(jù)，并從中重構(gòu)出6357個前額葉單神經(jīng)元軸突形態(tài)（圖A）。在獲得前額葉單神經(jīng)元投射圖譜后，科研團隊利用自主開發(fā)的聚類分析方法，定量刻畫比較神經(jīng)元軸突形態(tài)的相似性，獲得了64個投射亞型，并繪制出這些神經(jīng)元亞型在前額葉亞區(qū)的分布和皮層深淺層的分布（圖B）。此外，研究通過建立高空間分辨率的前額葉內(nèi)部連接網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)前額葉內(nèi)部連接網(wǎng)絡(luò)具有模塊化的性質(zhì)和等級結(jié)構(gòu)（圖C）。研究通過與前額葉轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行關(guān)聯(lián)分析，并利用逆向示蹤和單分子熒光原位雜交技術(shù)后，發(fā)現(xiàn)單個轉(zhuǎn)錄組亞型對應(yīng)著多個投射亞型這一重要規(guī)律（圖D）。

　　該研究開發(fā)了在腦圖譜大數(shù)據(jù)中高效重構(gòu)神經(jīng)元的軟件FNT，構(gòu)建了小鼠前額葉單神經(jīng)元投射圖譜，發(fā)現(xiàn)了前額葉存在64個神經(jīng)元投射亞型和前額葉內(nèi)部連接存在模塊和等級結(jié)構(gòu)，這為闡釋前額葉的工作機制提供了線索。其中，單個轉(zhuǎn)錄組亞型對應(yīng)多個投射亞型這一規(guī)律，進一步突顯出單神經(jīng)元投射圖譜對于神經(jīng)元分類的重要性。

　　研究工作得到上海市、科技部、中科院、國家自然科學(xué)基金的支持。

　　小鼠圖譜共享網(wǎng)站

　　（A）6357個前額葉單神經(jīng)元在前額葉亞區(qū)的分布和全腦軸突形態(tài)。（B）神經(jīng)元形態(tài)學(xué)分類。64個前額葉投射神經(jīng)元亞型在前額葉亞區(qū)和皮層深淺的分布。（C）前額葉內(nèi)部連接網(wǎng)絡(luò)的模塊化和等級結(jié)構(gòu)。（D）前額葉投射亞型與基因亞型的關(guān)系（CT皮層丘腦神經(jīng)元在PL-ORB腦區(qū)）。 

　　小鼠前額葉195個神經(jīng)元的全腦投射